Expresión de Podoplanina en Mucosa Oral Normal, Displasia Epitelial Oral y Carcinoma Oral de Células Escamosas / Immunoexpression of Podoplanin in Normal Oral Mucosa, Epithelial Displasia and Oral Squamous Cell Carcinoma

RESUMEN: Evaluar la inmunoexpresión de podoplanina (PDPN) en el epitelio y vasos linfáticos en muestras de mucosa oral normal (MON), displasia epitelial oral (DEO) y carcinoma espinocelular oral (CECO). Estudio descriptivo de serie de casos. La muestra estuvo constituida por 19 casos de MON, 18 de DEO y 19 de CECO. Se consideraron positivas aquellas células con tinción de membrana y/o citoplasmático. Para la evaluación de PDPN epitelial se realizó un análisis semicuantitativo a través del producto entre la intensidad y porcentaje de células teñidas (immunoreactive score- IRS), mientras que para la evaluación de los vasos linfáticos, se determinó la densidad media vascular (DMV) a partir del promedio de la densidad linfática en tres campos ópticos por muestra. El mayor valor de IRS se observó en el grupo de CECO, seguido por DEO y el menor valor fue en el grupo de MON, con diferencias estadísticamente significativas al comparar CECO/DEO (p= 0,0200) y CECO/MON (p= 0,0078). Al comparar los valores de DMV según diagnóstico, se obtuvo que estos fueron bastante similares y no presentaron diferencias significativas entre sí (p= 0,4273). Finalmente, se analizó la relación entre los valores de IRS de podoplanina epitelial y la densidad media vascular de los linfáticos, a través del test de independencia de Spearman, el cual determinó que no hay un grado de asociación entre ambas variables (p= 0,2056). Conclusión: el IRS epitelial aumenta su valor al comparar muestras de MON, DEO y CECO. No existen diferencias significativas, en las muestras estudiadas, entre los valores de DMV linfática. No existe relación entre la expresión de PDPN epitelial y DMV linfática en muestras de DEO y CECO.

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the expression of Podoplanin (PDPN) in epithelium and lymphatic vessels in normal oral mucosa (NOM), oral epithelial displasia (OED) and oral squamous cell carcinoma (OSCC). A descriptive case study was carried out. Nineteen histological samples diagnosed with NOM, 18 diagnosed with OED and 19 with OSCC. Immunopositive cells for PDPN were those that presented membrane and/or cytoplasmic staining. A semi-quantitative analysis of the stained sections was made according to the immunoreactive score (IRS) for the extension and intensity of epithelial cells, while the evaluation of lymphangiogenesis was made through the calculation of the mean vascular density (MVD). The results indicated the higher IRS value was in OSCC followed by OED and lowest in NOM, with significant differences between OSCC/OED (p= 0.0200) and OSCC/NOM (p= 0.0078). No differences in MVD were found between the studied samples (p= 0.4273). Finally, the correlation between the value of epithelial IRS and MVD was analyzed through Spearman Independence test, which determined there was no statistically significant relationship between the studied variables (p= 0.2056). In conclusion, epithelial IRS value is greater in OSCC samples than OED and NOM. There was no statistically significant difference in lymphatic MVD in the studied samples. There is no correlation between the epithelial PDPN expression and lymphatic MVD in OSCC and OED samples.

Valor prognóstico da imunoexpressão de podoplanina e de CD44v6 na recidiva locorregional dos pacientes com câncer de lábio / Prognostic value of podoplanin and CD44v6 immunoexpressions on locoregional recurrence of the patients with lip cancer

O objetivo deste estudo consistiu em avaliar a expressão imuno-histoquímica da podoplanina e do CD44v6 pelas células malignas, verificando a associação destas proteínas com as variáveis clínicas, microscópicas, com o índice histopatológico de malignidade e com a sobrevivência livre de doença de 91 pacientes portadores de carcinomas espinocelulares (CEC) de lábio inferior, tratados no Centro de Tratamento e Pesquisa do Hospital do Câncer A.C.Camargo, São Paulo. Os tumores foram corados, separadamente, com os anticorpos anti-podoplanina e anti-CD44v6, sendo avaliada a imunoexpressão destas proteínas pelas células neoplásicas, no front de invasão tumoral, por meio de um método semi-quantitativo de escores. A associação da expressão da podoplanina e do CD44v6 com as variáveis demográficas, clínicas e microscópicas foi feita pelo teste do qui-quadrado ou exato de Fisher. As taxas de sobrevivência livre de doença, acumuladas em cinco e dez anos, foram calculadas pelo teste de Kaplan-Meier e a influência das variáveis clínicas e microscópicas no prognóstico avaliadas pelo modelo de regressão de Cox. A correlação entre a podoplanina e o CD44v6 foi analisada pelo teste de Spearman. Em todos os testes estatísticos utilizou-se um nível de significância de 5%. Os resultados mostraram uma predominância da forte expressão membranosa e citoplasmática da podoplanina pelas células malignas. Verificou-se uma associação significativa da podoplanina citoplasmática com a recidiva locorregional (p=0,028) e da podoplanina membranosa com o índice histopatológico de malignidade tumoral (p=0,026). O CD44v6 foi fortemente expresso pelas células neoplásicas de 95,4% dos CECs e significativamente, associado com o estadiamento clínico T (p=0,034). Não houve correlação entre a podoplanina e o CD44v6 nos CECs de lábio inferior. A forte expressão de podoplanina membranosa (p=0,016) e citoplasmática (p=0,030) pelas células malignas foi fator de prognóstico favorável independente na sobrevivência livre de doença. Concluímos que a podoplanina e o CD44v6 são fortemente expressos pelas células neoplásicas e que a forte imunoexpressão membranosa e citoplasmática da podoplanina pode auxiliar na identificação do risco de recidiva locorregional nos pacientes portadores de carcinoma espinocelular de lábio inferior.(AU)

The aim of this study was evalute the podoplanin and CD44v6 immunohistochemical expression by malignant cells and its association with the clinical and microscopic variables, tumor histopathological grading and disease-free survival of 91 patients with lip squamous cell carcinomas (SCC), submitted to surgical treatment at Research and Treatment Center of the Cancer Hospital A.C. Camargo, São Paulo. The tumors were stained separately, with the antibodies anti-podoplanin and anti-CD44v6, and the immunoexpression of these proteins, by the neoplastic cells in the invasion front, was evaluated by a semi-quantitative scores method. Chi-square test or Fishers exact test was used to analyze the association of podoplanin and CD44v6 expression with demographic, clinical, and microscopic variables. Disease-free survival in five and ten years, were calculated by the Kaplan-Meier method and the influence of clinical and microscopic variables on prognosis were evaluated by the Cox regression model. The correlation between podoplanin and CD44v6 expression was analyzed by Spearman's test and a significance level of 5% was used in all statistical tests. The results showed a predominance of strong membranous and cytoplasmic podoplanin expression by malignant cells. An association between cytoplasmic podoplanin and locorregional recurrence (p=0,028) and membranous podoplanin with tumor histopathological grading (p=0,026). CD44v6 was strongly expressed in 95.4% of the SCCs neoplastic cells and significantly associated with the clinical staging T (p=0,034). There was no correlation between podoplanin and CD44v6 expression in the lower lip SCC. The strong expression of membranous (p=0.016) and cytoplasmic (p=0.030) podoplanin by malignant cells was a favorable independent prognostic factor in disease-free survival. Concluding, the podoplanin and CD44v6 are strongly expressed by neoplastic cells and the strong membranous and cytoplasmic immunoexpression of podoplanin can help the identification of locoregional recurrence risk in patients with squamous cell carcinoma of the lower lip.(AU)

Avaliação da linfangiogênese intratumoral em carcinoma precoce do colo de útero / Evaluation of intratumoral lymphangiogenesis in early-stage carcinoma of the uterine cervix

A incidência do câncer cervical permanece elevada em nosso país, provavelmente devido ao rastreamento ser realizado principalmente em áreas urbanas e haver áreas menos favorecidas onde os programas de rastreamento não são efetivos. É bem sabido que a mortalidade pelo câncer raramente é devida ao tumor primário, mas à disseminação metastática das células tumorais em órgãos distantes. A via linfática é considerada a preferencial para disseminação metastática nos tumores ginecológicos. E o estágio clínico e os linfonodos regionais são considerados os fatores prognósticos mais potentes no carcinoma de colo útero. A compreensão da linfangiogênese pode ser considerada uma importante chave na elucidação dos mecanismos usados pelas células tumorais na sua disseminação. Os objetivos do presente estudo são avaliar as características clínico-patológicas do câncer do colo do útero e sua associação com o comprometimento linfonodal e o desfecho; avaliar a linfangiogênese intratumoral pela análise quantitativa da microdensidade vascular linfática (MDVL), usando o método imunoistoquímico para marcação dos vasos linfáticos e três métodos morfométricos para a quantificação; determinar a associação entre a MDVL, características clínico-patológicas de apresentação, comprometimento linfonodal, desfecho e a expressão de podoplanina em células neoplásicas e a expressão da podoplanina em células fibroblásticas do estroma intratumoral. Os estudos sobre a MLVD em câncer de colo de útero são raros e controversos. Nossos resultados demonstraram que a MLVD foi mais acentuada nos tumores de menor tamanho (<2 cm), nos estádios iniciais (IB1), com menos infiltrações, sem comprometimento vascular e sem comprometimento linfonodal, provavelmente porque a indução da linfangiogênese pode ser um evento inicial na progressão do câncer, quando ainda nem todos os vasos neoformados estão funcionantes ou patentes. Isto explicaria a elevada...

Cervix carcinoma incidence remains still high in our country, probably as the screening occurrence is carried out mainly in the urban areas and there are less favored areas where the screening programs are not effective. It is well known that the cancer mortality is rarely caused by the primary tumor, but it is caused by the metastatic spread of tumor cells in distant organs. The lymphatic route is considered the choice for the metastatic dissemination in the gynecological tumors. And the clinical stage and the regional lymphonodes are considered the most powerful prognostic factors in the uterine cervix cancer. The understanding of the lymphangiogenesis can be considered an important key for the elucidation of the mechanisms used in the tumor cells dissemination. The current study objectives are to evaluate the clinic-pathological characteristics of the uterine cervix carcinoma and its association with the lymphnodal involvement and outcome; to evaluate the intratumoral lymphangiogenesis by the quantitative analysis of the lymphatic vessel micro density (LVMD), using the immunoistochemical method for marking the lymphatic vessels and three morphometric methods for the quantification. To determine the association between the LVMD, the clinicpathological characteristics, the lymphonodal involvement and outcome and the podoplanin expression in neoplasic cells and in fibroblastic cells of the intratumoral stroma. Studies about the LVDM in uterine cervical cancer are rare and controversial. Our results demonstrated that the LVDM was more remarkable in the smaller tumors(<2cm), in the initial stages (IB1), with less infiltrations, with no vascular involvement and no lymphnodal involvement. Probably because the induction of lymphangiogenesis may be an early event in cancer progression, while still not all the newly formed vessels are functioning or patent. This would explain the high LVMD in the initial tumors while the lymphonodes were frequently negative...

Neoplasias salivares com diferenciação mioepitelial: estudo da imunoexpressão do CD10 (CALLA/NEP 24.11) e da podoplanina (D2-40) / Salivary neoplasias with myoepithelial differentiation

CD10 e Podoplanina (D2-40), além de expressos nas células mioepiteliais, estão envolvidos na progressão tumoral e podem ser utilizados como marcadores prognósticos. Em 79 neoplasias salivares com diferenciação mioepitelial (44 malignas e 35 benignas), analisamos a expressão dessas proteínas nas células neoplásicas, na reação desmoplásica tumoral e, nos carcinomas adenóides císticos (CAC), verificamos possível correlação com fatores prognósticos. CD10 foi negativo nas células epiteliais em 100 por cento dos casos. Nas mioepiteliais, foi positivo em 25,71 por cento das lesões benignas e em 27,27 por cento das malignas, sendo esses resultados significantemente inferiores àqueles da a-SMA (60 por cento e 88,64 por cento, respectivamente). CD10 foi positivo em 83,33 por cento, 30 por cento, 27,7 por cento e 40 por cento dos carcinomas epiteliais-mioepiteliais (CEME), adenomas pleomórficos, mioepiteliomas e carcinomas mioepiteliais, respectivamente, e negativo em 100 por cento dos CAC, adenocarcinomas polimórficos de baixo grau (APBG) e adenomas de células basais. No estroma tumoral, a expressão do CD10 (38,64 por cento) foi significantemente...

CD10 and Podoplanin (D2-40) are expressed in myoepithelial cells and, in addition, are involved in tumoral progression and can be utilized as prognostic markers. In a series of 79 salivary neoplasias with myoepithelial differentiation (44 malignant and 35 benign), the expression of these proteins was analyzed in tumor cells as well as in tumor-associated stromal cells and it was correlated with prognostic factors in a select group of lesions (adenoid cystic carcinomas). In epithelial cells, CD10 was negative in 100 per cent of the cases. In myoepithelial cells, CD10 was positive in 25.71 per cent of the benign neoplasias and in 27.27 per cent of the malignant ones and this expressions was significantly lower in comparison to that of a-smooth muscle actin (a-SMA) (60 per cent and 88.64 per cent, respectively). In neoplasias classified according to histological subtype, CD10 was positive in 83.33 per cent, 30 per cent, 27.27 per cent and 40 per cent of epithelial-myoepithelial carcinomas (EMC), pleomorphic adenomas, myoepitheliomas and myoepithelial carcinomas, respectively...